Basato sul gioco da tavolo omonimo, 221 B Baker St. mette fino a quattro giocatori l'uno contro l'altro in una corsa per risolvere misteri ambientati nella Londra Vittoriana. Dopo aver scelto un personaggio (Sherlock Holmes, Dr. Watson, Irene Adler o Inspector Lestrade), i giocatori selezionano uno dei trenta misteri disponibili e leggono il relativo fascicolo del caso nel manuale del gioco. Il fascicolo del caso presenta i particolari del caso, indica le persone coinvolte e spiega cosa i giocatori devono dedurre per vincere il gioco. Prima di risolvere il caso, i giocatori devono visitare Scotland Yard per ottenere un distintivo. I giocatori potrebbero anche voler utilizzare un distintivo per bloccare una posizione con un indizio utile, costringendo gli altri giocatori a deviare verso il fabbro. Una volta che un giocatore ritiene di aver risolto il caso, deve tornare a Baker Street e rispondere a un quiz. Se il giocatore risulta errato, gli altri giocatori possono continuare.